Los ovarios están entre los primeros órganos que envejecen, y eso influye no solo en la fertilidad, sino también en la salud general. Para estudiar genes en la edad adulta, los científicos suelen recurrir a los sistemas Cre inducibles por tamoxifeno: el fármaco activa la recombinación en el momento deseado y así se evitan los efectos secundarios de intervenir durante el desarrollo. Sin embargo, el tamoxifeno es en sí mismo un modulador de los receptores de estrógeno, y el ovario es extremadamente sensible a las señales hormonales. Junto a este trabajo, en el archivo hay estudios sobre el envejecimiento celular y el control de dosis de fármacos, pero las consecuencias a largo plazo del tamoxifeno para los ovarios seguían sin estar claras.
Se dividieron al azar hembras de ratón de la cepa Cx3cr1 Cre/ERT2 NuTRAP de 3 meses de edad en dos grupos: a uno se le administró tamoxifeno en aceite de girasol durante cinco días consecutivos, y al otro solo el aceite. El ciclo estral se siguió mediante frotis vaginales a los 3 días y a los 2, 3 y 9 meses después de las inyecciones. A los 6 y 12 meses se recogieron los ovarios para histología y secuenciación de ARN. La fibrosis se evaluó con tinción de picrosirius rojo, y la acumulación de células gigantes multinucleadas, con sudán negro.
El tamoxifeno provocó una alteración brusca pero temporal del ciclo estral: justo después del tratamiento las ratonas se quedaban atascadas en metaestro, pero a los 3 meses el ciclo se recuperaba por completo y después no se diferenciaba del control. Los signos histológicos de envejecimiento (fibrosis y acumulación de células gigantes multinucleadas) aumentaban con la edad por igual en ambos grupos, sin influencia del tamoxifeno. El análisis transcriptómico reveló solo tres genes con expresión alterada en las ratonas jóvenes y tres en las viejas al comparar directamente los tratamientos, y además esos genes no están relacionados con el envejecimiento ovárico. Los cambios de expresión asociados a la edad fueron prácticamente idénticos en las ratonas que recibieron tamoxifeno y en las que recibieron el vehículo: la correlación de los logaritmos de la magnitud de los cambios fue de 0,771.
El trabajo muestra que los modelos inducibles por tamoxifeno son aptos para estudiar el envejecimiento ovárico siempre que se respete el periodo de recuperación. A diferencia de los estudios vecinos, centrados en los mecanismos celulares del envejecimiento o en la farmacocinética, aquí se comprueban por primera vez de forma sistemática las consecuencias a largo plazo del propio inductor a nivel de todo el órgano. Esto cubre un vacío importante en la interpretación de numerosos experimentos sobre envejecimiento reproductivo.
Es prometedor comprobar otras cepas Cre, dosis, edades de administración y periodos de observación más largos. Un interés aparte tiene el efecto del tamoxifeno sobre las subpoblaciones celulares del ovario, en especial sobre los macrófagos tisulares, que pueden marcarse en este modelo. También es importante evaluar los efectos sobre las trompas de Falopio, ya que es ahí donde a menudo se origina el cáncer de ovario.
Los resultados influirán directamente en la planificación de experimentos en biología reproductiva, gerociencia y oncología, donde se utilizan modelos genéticos inducibles en ratones.
Realizar pruebas similares con otros sistemas inducibles y en un rango más amplio de edades. Estudiar la composición celular de los ovarios después del tamoxifeno mediante single-cell RNA-seq.
El envejecimiento ovárico aún no tiene un modelo único que explique la contribución de los cambios hormonales, inmunes y estromales. Este trabajo precisa los límites de aplicabilidad de una herramienta muy popular, lo que permite separar los artefactos de la inducción de los verdaderos mecanismos del envejecimiento.
En las personas, una ratona de 6 meses equivale aproximadamente a una mujer de 20 años, y una de 12 meses, a una de 40. Es decir, el experimento abarca el periodo que va desde el pico de fertilidad hasta el inicio del declive relacionado con la edad.
No publicado en arXiv. Aquí están su página, el PDF y la formalización: puede comprobarlo usted mismo, no solo leer nuestro análisis.