ПЦР — это метод размножения специфических последовательностей ДНК путём многократных циклов нагревания и охлаждения.Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это ферментативный метод амплификации (многократного копирования) ДНК в пробирке (in vitro). Она позволяет избирательно синтезировать огромное количество копий заданного фрагмента ДНК, используя термостабильную ДНК-полимеразу (фермент, выдерживающий высокие температуры) и циклы изменения температуры. Метод произвёл революцию в молекулярной биологии, медицине и криминалистике.
Концепцию амплификации ДНК с помощью повторяющихся циклов репликации предложил Кэри Муллис в 1983 году, работая в биотехнологической компании Cetus Corporation. Идея пришла к нему во время вечерней поездки по калифорнийскому шоссе. Первые эксперименты с использованием фрагмента Клёнова (нестабильного при высоких температурах) были трудоёмкими, так как фермент приходилось добавлять после каждого цикла денатурации. Ключевым прорывом стало использование термостабильной ДНК-полимеразы Taq, выделенной из термофильных бактерий Yellowstone, что позволило автоматизировать процесс. В 1993 году Муллис получил Нобелевскую премию по химии. С тех пор метод непрерывно совершенствовался: появились ПЦР в реальном времени (кПЦР), цифровая ПЦР и другие варианты.
Процесс состоит из трёх основных стадий: (1) Денатурация при ~95°C — разрыв водородных связей между комплементарными цепями ДНК с образованием одноцепочечных матриц. (2) Отжиг праймеров при ~50–65°C — специфическое связывание коротких олигонуклеотидных праймеров с комплементарными участками на матрицах. (3) Элонгация при ~72°C — термостабильная ДНК-полимераза синтезирует новую цепь ДНК, начиная от 3'-конца праймера, используя дезоксинуклеотидтрифосфаты (dNTP) как строительные блоки. Циклы повторяются 25–40 раз в амплификаторе. Ключевой параметр — специфичность, обеспечиваемая подбором праймеров и оптимизацией температуры отжига. Количественный вариант (qPCR) использует флуоресцентные зонды для мониторинга накопления продукта в реальном времени, что позволяет определять исходное количество матрицы.
Основа тестов на COVID-19, установления отцовства и поиска преступников по капле крови.
Чувствительность ПЦР такова, что теоретически можно обнаружить одну-единственную молекулу ДНК в образце. Именно поэтому тесты на коронавирус могли выявлять инфекцию на самых ранних стадиях.

















